WB实验之蛋白胶注意事项

1. 注意Tris buff的PH值，以及平时所用的水的PH 值。PH值改变会使带型非常怪异，所有蛋白和溴酚蓝压成一条细线，如果溴酚蓝前有红色染料，那么此染料彗星式拖尾从溴酚蓝一直延伸到胶底部。

2. 上下层式电泳装置若漏液，哪边漏液，电泳条带往哪边倾斜。内外式电泳装置漏液，则装置处于短路状态，液体会过热。SDS-PAGE胶可能局部自溶，条带扭曲、变形。

3. 配胶用玻璃板和边条应及时洗净。尽管玻璃看似平滑，但是一些细微的凹陷处会凝结肉眼无法分辨的胶颗粒，其坏处是，在该部位极易导致不均匀的胶块，样品经过该处或电泳散热不好，条带变形。如果是RNA的超薄胶，胶板的颗粒会导致局部巨大气泡，非常难于清除：蛋白胶也会导致一些小气泡的产生。玻璃板没洗净的另一个坏处是，玻璃表面月光滑粘附越牢，未洗净的玻璃板会削弱和胶体间的粘附力，拔梳子或边条时会产生微小的错动，胶体下部出现大量气泡；严重的错动会使上样时，样品从胶和玻璃之间的间隙漏光，或者甚至胶和玻璃板分开。